技术文章

您的位置

首页 技术文章

晶抗详述:影响ELISA试剂盒测定成果的要素

点击次数:62 发布时间:2018/1/8

血清是最常用的ELISA试剂盒标本,血浆一般可视为与血清平等的标本,标本引起的假阳性和假阴性成果主要是搅扰性物质所形成的,分为内源性物质和外源性物质两种:
1.内源性物质有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性搅扰物质,能够不同程度影响检测成果。常见的搅扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原本身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体、穿插反响物质和其它物质等。
(1)类风湿因子
人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)能够与ELISA体系中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合,然后导致假阳性。
处理该状况的方法是:
①用F(ab)2替代完好的IgG;
②标本用联有热变性(63℃,10min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG参加到标本稀释液中同样有用);
③检测抗原时,能够用2-巯基乙醇等参加到标本稀释液中,使RF降解。
(2)补体ELISA体系中固相一抗和符号二抗过程中,抗体分子发作变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被露出出来,使C1q能够将二者连接起来,然后形成假阳性。处理的方法是:①用EDTA稀释标本;②用53℃,10min或56℃,30min加热血清使C1q灭活。
(3)嗜异性抗体人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s)结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA试剂盒体系中一抗和二抗连接起来,也能形成假阳性。处理的方法是:可在标本稀释液中参加过量的动物Ig(s),但参加量缺乏或亚类不一起无效。
(4)嗜靶抗原的本身抗体抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的本身抗体,有时能与靶抗原结合构成复合物,在ELISA方法中均可搅扰抗原抗体测定成果。为避免以上状况呈现,处理的方法是:测定前需用理化方法将其解离后再测定。
(5)医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体临床标本展开的用鼠源性CD3等单克隆抗体医治,用放射性同位素符号鼠源性抗体的印象确诊及靶向医治等新技术,均有可能使这些患者体内发生抗鼠抗体;别的,被鼠等啮齿类动物咬伤的患者体内也能够发生抗鼠Ig(s)抗体。这些患者ELISA测守时均可发生假阳性。处理的方法是:测定抗原时,在标本中参加足量的正常鼠Ig(s),然后战胜因为上述原因形成的假阳性。
(6)穿插反响物质类、类AFP样物质等,是与靶抗原有穿插反响的物质。在用多抗测定抗原时对测定成果影响不大,但在用单克隆抗体测定抗原时,如果穿插抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时,也会呈现假阳性成果。
(7)标本中其它成分的影响血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等,均对ELISA测定成果有搅扰效果。
2.外源性物质
外源性物质常常是因为用于ELISA试剂盒测定的血标本的收集、储存等不当所形成的。如标本溶血、标本被细菌污染、标本储存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。

 

上海晶抗生物工程有限公司 版权所有 总访问量:58166 地址:上海市金山区枫泾镇环东一路65弄2号3462室 邮编:201501
电话:021-66980655 传真:021-66980655 手机: 联系人:唐粉 邮箱:2274825889@qq.com
GoogleSitemap 网址:www.shjktf.com 技术支持:中国仪表网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备16026504号-1
联系人:唐粉
电话
021-66980655
手机

点击这里给我发消息
 

中国仪表网

中级会员

中级会员

3

推荐收藏该企业网站